lipo3000转染***服务周到 博特龙公司

1.以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐一次（即每孔）转染的低内毒0素质粒 DNA 用量为 1~2μg、转染***用量为 3~5μl（请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告***进行优化），质粒和转染***可用无菌生理盐水稀释。

2.QuickShuttle 经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，虽然在实验中推荐使用 DMEM，但有实验结果表明 M199 能够显著增强 QuickShuttle 对 Vero 细胞和 293FT 细胞的转染效果，因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。

事实上我们是***早提出小鼠多抗制备理念的，我们正在说服更多的客户使用QuickAntibody免0疫佐剂进行快速小鼠多抗制备，以替代常规的兔多抗制备。我们的QuickShuttle转染***在国际上***早引入立传立转、一分钟快速转染和无需换液等概念，将转染过程由传统的18~24小时缩短到几分钟。该转染***尤其适合各种病毒载体制备和大规模蛋白表达，可以方便快速地同时转染数十瓶甚至上百瓶细胞。

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

注意事项：

1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。

2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。

3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血0清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。

4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染***用量为 3~5μl，请在正式实验前根据不同培养基用报告***进行优化。

5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至 80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。

6. 立传立转对细胞状态要求较高，如果转染效果不理想，可按 QuickShuttle-Enhanced 的转染方法（见本说明书第 4 页），在细胞贴壁后进行标准转染操作。

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DEAE-葡聚糖转染法

DEAE-葡聚糖转染法的原理时带正电的DEAE-葡聚糖与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成复合物通过细胞内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核。此法只适合瞬时转染实验，转染效率与DEAE-葡聚糖的浓度以及细胞与DNA/EDAE-葡聚糖混合液接触时间的长短有关，可采用较高浓度的DEAE-葡聚糖（1g/L）作用较短时间（0.5-1.5h），也可用较低浓度（250mg/L）的DEAE-葡聚糖坐拥较长时间（8h）。