免组化体即时留言「博特龙」

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

1.选择部分样品进行预实验，参考目的蛋白一抗说明书进行3个稀释度的预实验

2.向客户反馈预实验结果，等待客户确认预实验结果后确定是否进行正式实验

3.请您提供质量0保证的一抗（或委托我公司代购）。抗0体的使用量通过预实验后进行确认，一般不回收使用一抗

4.如果需要对膜上目的蛋白进行抗0体剥离（洗脱或者 stripping）的，请提前说明

实验步骤：

1 、首先将ELISA***盒***室温（大约30分），然后用纯水把清洗液配成工作浓度（1份浓缩清洗液加19份纯水）。

2 、取出酶标板。每个标本需要6孔，阳性对照6孔，阴性对照6孔。多余的用自封袋保存，记得放入干燥剂。

3 、将标本检测孔每孔先加入标本稀释液各50μl。然后将50μl 细胞培养上清（或特异亲和纯化的抗0体）再加入酶标微孔板，每个标本加6孔；阳性对照和阴性对照孔不加标本稀释液也是各加6孔每孔100μl。贴上封板膜37℃温育30分钟。

博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

取血：

免0疫一周后，可以耳动脉取血检测抗0体效价。因为起初几次免0疫产生的抗0体的效价比较低，头两次取血，够检测用即可。在三次免0疫后，可以获得较高0效价的抗0体，每次取血量可以在40ml，不要取太多，否则会造成兔子贫0血。

前几次取血用19号针头对兔子进行耳动脉取血，室温过夜析出血0清。

***后一次取血可以采用颈动脉放血，具体操作如下：

1、家兔仰卧于兔架上固定头部，用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤。

2、沿颈部中线用***刀切开皮肤约10cm，分离皮下结缔***，直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作，如碰到小血管出血，可用止血钳止血)。

3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松***，暴露出颈总动脉后用弯头眼0科镊使之游离，剥离***和结缔***。

4、于动脉下套入两根黑丝线，分别置于远心及近心端。结扎远心端的丝线。近心端的动脉用血管夹夹住。

5、用小拇指垫在血管下，用尖头眼0科***剪在两根丝线间的动脉璧上剪一小口(勿剪断)，插入塑料放血管。再将近心端的丝线结扎固定于放血管上，以防放血管滑脱。

6、松开止血钳，使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。